实验共分三个步骤。

　　第一步DNA提取

　　1.样品分别用刀片切碎，1.5ml离心管中加入约100mg样品，加600 μlDNA提取溶液(pH8.0)旋涡混匀，加入5μl 10mg/ml蛋白酶K，56℃水浴60min；

　　2. 12000g离心5min，取上清转移到新的1.5ml管子中；

　　3.加600μl酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)剧烈振荡，12000g离心10min；

　　4. ……

　　这些步骤共6个程序，要花去两个多小时。通俗的解释是：

　　先是把上面的三种肉用小刀切成末，各取两个大米那么大的小块，放在大约有一粒花生米那么多的溶液里，加进去蛋白酶，放在56℃的温水里泡一小时，再放在每分钟12000转的离心机上拼命转，肉里的DNA连溶解带甩地就出来了，再加溶液，再甩……反复好几次，最后就得到比较纯的DNA水溶液了。

　　第二步牛、猪源性成分P C R检测

　　PCR反应体系10 buffer(含Mg2+)2.5μl，dNTP终浓度100μM，引物niuU、niuL (zhuU、zhuL)的终浓度均为0.2 mol/L模板DNA为1μl……94变性30s 58℃退火30s 72℃延伸30s 32个循环， 72℃延伸5min……

　　这一步其实就是为了证明刚才提出的DNA是好的，能用。

　　用的是电泳的方法——电泳就是在带电环境下，让DNA游泳。

　　DNA是一种核酸，核酸是带负电的，两边接上电极，它就会朝正极游过去。在规定时间里，块头大就游得慢，块头小就游得快。正常的DNA，一定时间会游到哪里，是有科学依据的。游得太快接近负极的，说明块头太小，块头小说明DNA片断已经分解了，比较碎，就不能用了。

　　金博士说，比如有些凶杀案，尸体腐败得太厉害，DNA就做不成，因为已经被微生物分解了。

　　第三步PCR产物的检测

　　取4μl PCR产物在1.2%琼脂糖凝胶和1X TAE缓冲液中电泳10min(200V)后,在凝胶成像系统中观察并拍照记录……

　　这一步的说明最少，但最难理解。金博士昨天花了一个多小时跟我解释，大概意思是分两步：

　　一把上面提取的三种DNA，放在一个预先定制的溶液里，这里面充满了牛的DNA单链片段。在一定的温度条件下，牛肉DNA，就会在这种环境里成几何倍地复制、扩增，扩到一定数目，就能电泳，在紫外灯照射下，能看到它们游到了一个特定的地方；而猪肉DNA，无法和牛DNA的单链配对，所以也没办法复制，它在电泳时就不会有任何表现。

　　然后，在充满猪的DNA单链片段的溶液里，牛的DNA也无法复制，所以也不会有任何表现。

　　实验结论：1.待检测样品B为牛肉2.待检测样品B中不含有猪肉成分

　　小本经营，却花2800元证明自己的信誉、给顾客一个放心。这样的顶真，是值得称赞的。

　　鉴于此，快报在这里给“老牛”做一次形象宣传，帮他的摊位吆喝一下生意。

　　“老牛”，真名王群一，43岁，慈溪范市镇人；以前在老家卖牛肉，1992年结婚，老婆是同一个镇的；1995年和老婆来杭州，在朝晖农贸市场卖牛肉至今，很多顾客和经营户称他“老牛”。

　　“老牛”现在汽车南站附近租房，每天凌晨3点半起床，去近江农贸市场选货进货，早上6点拉到朝晖农贸市场摊位上；老婆负责卖，老牛负责给外面的饭店和单位订户送货。

　　“老牛”有一个女儿，在慈溪读书，下半年要上初三了；孩子前几天刚放暑假，老牛让老婆今天回家，把女儿接到杭州来玩。尽管离得不远，因为生意忙，他们一年回不了几趟家。